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PCR實操避坑分享
PCR實操避坑分享 發布時間:2025-09-28
前段時間和大家分享了PCR反應的過程控制,今天來聊聊PCR的操作手法。實操可以說是整個PCR實驗流程中最容易被忽略卻又至關重要的一環。下面小編就來分享一下自己當初的一些經驗心得,僅代表個人看法。先說體系配置(各組分分開,非預混液)。配置前先計算好所需要的各組分體積,統一配置好后再...
  • 2022

    4-6
    程序降溫盒使用經驗分析
    程序降溫盒的使用方法直都搞不明白,覺得是不是應該把程序降溫凍存盒先從-80度移到室溫放一段時間(細胞剛開始還沒凍的時候就是室溫),然后把細胞放進去,再一起移到-80度,這樣才能實現程序降溫呢?時間使用長了,感覺里面的液體是不是異丙醇啊,使用...
  • 2022

    3-23
    三槽梯度PCR儀你真的了解嗎?
    一次性PCR擴增可以設置一系列不同的退火溫度條件(通常12種溫度梯度)的稱之為梯度PCR儀。通過設置一系列的梯度退火溫度進行擴增,從而一次性PCR擴增就可以篩選出表達量高的適合退火溫度進行有效的擴增。主要用于研究未知DNA退火溫度的擴增,這...
  • 2022

    3-16
    程序降溫盒使用小技巧
    程序降溫盒在沒有酒精或任何液體的情況下,能確保在低溫冰箱中樣品的降溫速率為-1℃/分鐘。它們可以運用于各種細胞類型,包括干細胞,原代細胞和細胞系。這對于大多數需要培養的細胞系來說是非常理想的。已經通過干細胞,原代細胞和細胞系的使用,證明了提...
  • 2022

    3-10
    迷你梯度PCR儀常用的五種分析方法
    迷你梯度PCR儀的梯度溫度控制是一項可有助于PCR中引物退火優化的功能。梯度設定的目的是在模塊之間實現變化的溫度,通過每列之間≥2°C的間隔溫度升降,使得可同時對于一系列的溫度進行測試以獲取引物退火溫度。該技術的一種形式便是設計帶有三個或更...
  • 2022

    3-1
    三槽梯度PCR儀科普知識大全,你真不一定都懂
    三槽梯度PCR儀溫度的準確性可能會對PCR的成敗與否起決定性作用,因為PCR的三個主要步驟都依賴于溫度。類似地,加熱模塊上孔與孔之間的溫度一致性對于獲取可靠而可重復的PCR結果也是至關重要的。因此,所使用的PCR儀能在模塊之間準確到達設定的...
  • 2022

    1-21
    雙槽梯度PCR儀應該這樣使用
    雙槽梯度PCR儀的反應原理類似于DNA的天然復制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性一退火(復性)--延伸三個基本反應步驟構成:①模板DNA的變性:模板DNA經加熱至94℃左右一定時聚合酶鏈式反應間后,使模板DN...
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